技術(shù)文章_第(166)頁－上海喆圖科學(xué)儀器有限公司

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微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)
1.培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。2.常見的培養(yǎng)基包括：液體狀態(tài)的液體培養(yǎng)基，可用于工業(yè)生產(chǎn)；添加了凝固劑(如瓊脂)的固體培養(yǎng)基，常用于微生物分離、鑒定，活菌計(jì)數(shù)，菌種保藏等，微生物在固體培養(yǎng)基表面生長可形成肉眼可見的菌落。3.培養(yǎng)基一般都含有水、碳源(包括無機(jī)碳源如CO2、有機(jī)碳源如葡萄糖)、氮源(包括無機(jī)氮源如NH3、有機(jī)氮源如蛋白質(zhì))和無機(jī)鹽。4.培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)(即生...
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)的四種方法
1.脂質(zhì)體法。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)。帶正電的陽離子脂質(zhì)體則不同，DNA并沒有預(yù)先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負(fù)電的DNA自動(dòng)結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復(fù)合物，從而吸附到帶負(fù)電的細(xì)胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導(dǎo)入細(xì)胞。脂質(zhì)體法始于1987年，此法的出現(xiàn)使得轉(zhuǎn)染效率、轉(zhuǎn)染的穩(wěn)定性和可重復(fù)性大大提高。陽離子脂質(zhì)體細(xì)胞毒性相對較高，對不同的細(xì)胞可能會干擾細(xì)胞的代謝。2.電穿孔法。通過短暫的高電場電脈沖處理細(xì)胞，沿細(xì)胞膜的電壓差異會導(dǎo)...
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細(xì)胞傳代的操作步驟
喆圖小編今天來講講細(xì)胞傳代的操作步驟：需要準(zhǔn)備的器材：酒精噴壺、PBS緩沖液、胰酶、培養(yǎng)基、巴氏吸管、水浴鍋、移液器、離心管、超凈臺、CO2培養(yǎng)箱、離心機(jī)等。然后我們要把我們準(zhǔn)備的器材放入超凈臺，打開紫外殺菌燈滅菌，需要注意的是若培養(yǎng)的細(xì)胞對溫度比較敏感，將培養(yǎng)基瓶子放入37℃的水浴鍋中，使得培養(yǎng)基溫度在37℃，再轉(zhuǎn)移到超凈臺紫外滅菌，當(dāng)然一般的細(xì)胞對培養(yǎng)基的溫度不是很敏感，不用對培養(yǎng)基加溫也是可以的。細(xì)胞培養(yǎng)間也需要紫外照射半小時(shí)左右。接下來小編就開始來操作了，全程嚴(yán)格無菌...
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焦炭灰分實(shí)驗(yàn)原理和方法
用箱式電阻爐做焦炭灰分實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)原理稱取一定量的空氣干燥試樣，放入馬弗爐中。以一定的速度加熱到815±10℃灰化灼燒到質(zhì)量恒定，以殘留物的質(zhì)量占試樣質(zhì)量的百分?jǐn)?shù)作為焦炭的灰分測試方法用預(yù)先灼燒至質(zhì)量恒定的灰皿,稱取粒度為0.2mm以下的空氣干燥試樣1±0.1g,稱準(zhǔn)至0.0002g,均勻地?cái)偲皆诨颐笾?，使其每平方厘米的質(zhì)量不超過0.15g。將灰皿送入不超過100℃的箱式電阻爐恒溫區(qū)中,關(guān)上爐門并使?fàn)t門留有15mm左右的縫隙。在不少于30min的時(shí)間...
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純化后蛋白質(zhì)的保存
蛋白質(zhì)純化后，大家是如何保存的呢？有沒有遇到過不同批次純化的蛋白，采用同樣的測試方法，活性卻不太一樣？有沒有遇到過新純化的蛋白，從低溫培養(yǎng)箱拿出融化后，居然沉淀了？蛋白質(zhì)畢竟是生物體內(nèi)的大分子，提純后如果保存不當(dāng)，會很容易失活變性。下面喆圖小編就帶大家聊一聊純化后蛋白的保存問題。原則保存蛋白質(zhì)應(yīng)該遵循下面這幾個(gè)原則:1.低溫低溫下保存蛋白質(zhì)是極其必要的。低溫意味著更低的能量，低溫下蛋白質(zhì)分子熱運(yùn)動(dòng)較低，其內(nèi)部的成鍵不容易斷裂。另外，在低溫下，微生物不容易生長，可能存在的蛋白酶...
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常見的數(shù)顯恒溫恒濕箱的故障及維修方法
數(shù)顯恒溫恒濕培養(yǎng)箱價(jià)格有著準(zhǔn)確的溫度和濕度控制系統(tǒng)，它為產(chǎn)業(yè)研究、生物技術(shù)測試提供所需要的各種環(huán)境模擬條件，喆圖該系列產(chǎn)品適用于藥物、紡織、食品加工等無菌試驗(yàn)、穩(wěn)定性檢查以及工業(yè)產(chǎn)品的原料性能、產(chǎn)品包裝、產(chǎn)品壽命等測試，如航空航天產(chǎn)品、儀器儀表、材料、電子電工、各種電子元?dú)饧诟邷鼗驖駸岘h(huán)境下的壽命測試。數(shù)顯恒溫恒濕箱常見故障及維修方法1：恒溫恒濕箱不加熱但溫控儀顯示正常，培養(yǎng)箱此故障多為加熱損壞，更換即可，在檢修培養(yǎng)箱該故障時(shí)應(yīng)確保循環(huán)風(fēng)機(jī)正常運(yùn)行。如果培養(yǎng)箱循環(huán)風(fēng)機(jī)不運(yùn)轉(zhuǎn)...
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Transwell遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)
基本原理將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細(xì)胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細(xì)胞生長、運(yùn)動(dòng)等的影響。應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜，就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究。侵襲實(shí)驗(yàn)中使用到的Matrigel是從小鼠EHS肉瘤中提取的基質(zhì)成分，含有LN、I...
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干細(xì)胞的培養(yǎng)
培養(yǎng)前的工作準(zhǔn)備充分包括耗材的處理、試劑的配置，無菌檢驗(yàn)等等。玻璃器皿的清洗。對于玻璃器皿(細(xì)胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子、小青霉素瓶等)要先用洗衣粉刷干凈(注意死角)，然后沖干凈。用酸液浸泡24h以上，之后用清水沖洗10遍，除去殘留酸液。瓶子之類，沖洗過程要使勁搖晃。然后在雙蒸水浸泡24h。晾干后包扎，使用鼓風(fēng)干燥箱160℃干烤2h待用。試劑配置。細(xì)胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意pH值的調(diào)節(jié)。無菌檢驗(yàn)。主要采用過濾除菌：如胰酶、抗生素、G-418溶液、各類培養(yǎng)基、丙...
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