電熱恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、振蕩水浴搖床、壓力蒸汽消毒器、干熱烤箱、低溫冰箱（－80℃）或液氮生物容器、普通冰箱、天平(精密度0.1g和0.0001g)、混勻振蕩器、勻漿器、菌落計數器、低溫高速離心機，玻璃器皿、生物安全柜等。

      培養(yǎng)基和試劑

      0.5mmol/L組氨酸－0.5mmol/L色氨酸－0.5mmol/L生物素溶液

       配制：將上述成分加熱，以溶解生物素，然后在0.068MPa下高壓滅菌20min。貯于4℃冰箱。若試驗中不使用大腸桿菌，則不添加色氨酸。

        頂層瓊脂培養(yǎng)基

        配制：上述成分混合后，于0.103MPa下高壓滅菌30min。實驗時，加入0.5mmol/L組氨酸－0.5mmol/L色氨酸－0.5mmol/L生物素溶液20mL。若試驗中不使用大腸桿菌，則不添加色氨酸。

         Vogel-Bonner(V-B)培養(yǎng)基E

      配制：先將前三種成分加熱溶解后，再將溶解的硫酸鎂緩緩倒入容量瓶中，加蒸餾水/去離子水至1000mL。于0.103MPa下高壓滅菌30min。儲于4℃冰箱。

       20%葡萄糖溶液

      配制：加少量蒸餾水/去離子水加溫溶解葡萄糖，再加蒸餾水/去離子水至1000mL。于0.068MPa下高壓滅菌20min。儲于4℃冰箱。

      底層瓊脂培養(yǎng)基

       配制：首先將前兩種成分于0.103MPa下高壓滅菌30min后，再加入后兩種成分，充分混勻倒底層平板。按每皿25mL制備平板，冷凝固化后倒置于電熱恒溫培養(yǎng)箱中24h，備用。

      營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基

      配制：將上述成分混合后，于0.103MPa下高壓滅菌30min。儲于4℃冰箱。

      鹽溶液(1.65mol/L KCl+0.4mol/L MgCl2)

      配制：在水中溶解上述成分后，于0.103MPa下高壓滅菌30min。儲于4℃冰箱。

      0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4)

      配制：溶解上述成分后，于0.103MPa下高壓滅菌30min。儲于4℃冰箱。

      S9混合液

       配制：將輔酶II和6-磷酸葡萄糖置于滅菌三角瓶內稱重，然后按上述相反的次序加入各種成分，使肝S9加到已有緩沖液的溶液中。該混合液必須臨用現(xiàn)配，并保存于冰水浴中。實驗結束，剩余S9混合液應該丟棄。

       菌株鑒定用和特殊用途試劑

       組氨酸-色氨酸-生物素平板

       配制：高壓滅菌瓊脂和水后，將滅菌20%葡萄糖，V-B培養(yǎng)基、組氨酸溶液，加進熱的瓊脂溶液中（若試驗中不使用大腸桿菌，則不添加色氨酸，同時蒸餾水/去離子水改為944mL）。待溶液稍微冷卻后，加入滅菌生物素，混勻，澆制平板。

       氨芐青霉素平板和氨芐青霉素/四環(huán)素平板

         配制：瓊脂和水高壓滅菌20min，將無菌的葡萄糖、VB鹽溶液、組氨酸溶液和色氨酸溶液，加進熱的瓊脂溶液中，混勻（若試驗中不使用大腸桿菌，則不添加色氨酸，同時蒸餾水/去離子水改為加940mL）。冷卻至大約50℃，無菌條件下加入四環(huán)素溶液和/或氨芐青霉素溶液。

         應該在傾注瓊脂平板后幾天內，制備主平板。

         營養(yǎng)瓊脂平板

        配制：于0.103MPa下高壓滅菌30min后傾注平板。

      試驗菌株及其生物學特性鑒定

      試驗菌株

采用以下菌株作為標準組合：

鼠傷寒沙門氏菌TA1535；

鼠傷寒沙門氏菌TA97或TA97a或TA1537；

鼠傷寒沙門氏菌TA98；

鼠傷寒沙門氏菌TA100；

鼠傷寒沙門氏菌TA102或大腸桿菌WP2uvrA或大腸桿菌WP2uvrA（pKM101）；

      生物學特性鑒定

新獲得的或長期保存的菌種，在試驗前必須進行菌株的生物特性鑒定。

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